109Q002｜第109回 薬剤師国家試験 過去問

正答

5

この問題のポイント

SDS-PAGE後のゲル内に分離されたタンパク質を、バンドとして一括検出する代表的な染色試薬を選びます。核酸染色や遊離アミノ酸の呈色反応と区別します。

解説

SDSはタンパク質を変性させ、概ね分子量に応じてポリアクリルアミドゲル内を移動させます。泳動後はクーマシーブリリアントブルーを用いると、色素がタンパク質の塩基性・芳香族アミノ酸残基などと相互作用し、青色のバンドとして可視化できます。背景の余分な色素を脱色することで、各バンドの位置を読み取ります。他の試薬にもアミノ基との反応や蛍光標識の用途はありますが、通常のゲル全体のタンパク質染色という目的には合いません。

選択肢の確認

1．ニンヒドリン：遊離アミノ酸などのアミノ基を呈色する試薬で、SDS-PAGE後の標準的なバンド染色ではありません。
2．臭化エチジウム：DNAなどの核酸に挿入して蛍光を示す核酸染色試薬です。
3．o︲フタルアルデヒド：第一級アミノ基の蛍光誘導体化などに用い、ゲル内タンパク質の一般染色には用いません。
4．フルオレセインイソチオシアネート：タンパク質などを蛍光標識する試薬ですが、泳動後の総タンパク質染色の第一選択ではありません。
5．クーマシーブリリアントブルー（クマシーブリリアントブルー）：正答。ゲル内のタンパク質バンドを青色に染めて検出します。

覚えるポイント

CBBはタンパク質、臭化エチジウムは核酸、ニンヒドリンは遊離アミノ酸の検出、と測定対象を対応させます。